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做ELISA實驗收集血漿樣本時為什么要加抗凝劑?顧名思義,抗凝劑就是為了防止血液凝固的。加了抗凝劑后,血液在一定的時間內會保持原來的物理化學狀態。如果沒加抗凝劑,血漿是凝聚在一起的,不好測定。常見的抗凝劑有哪些呢?今天就為您詳細總結如下:
?常見的血漿抗凝劑主要包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉和草酸鹽等,它們各有特點,適用于不同的實驗需求。
?肝素是最常用的抗凝劑之一,通過與抗凝血酶Ⅲ結合,抑制凝血酶的活性,從而阻止纖維蛋白原轉化為纖維蛋白。肝素抗凝的血漿適用于大多數生化檢測和部分免疫學實驗,但高濃度的肝素可能干擾PCR和某些ELISA實驗,需謹慎使用。
EDTA(乙二胺四乙酸)通過螯合鈣離子阻斷凝血級聯反應,能有效防止血液凝固。EDTA抗凝的血漿適用于血液學檢測,如血細胞計數,但由于其可能影響某些金屬離子依賴性酶活性,一般不推薦用于鈣、鎂等離子的測定。
檸檬酸鈉通過與鈣離子結合發揮抗凝作用,常用于凝血功能檢測(如PT、APTT)。其抗凝效果穩定,且對ELISA實驗干擾較小,因此是許多免疫學研究的首選抗凝劑。
草酸鹽(如草酸鉀、草酸鈉)也能通過結合鈣離子抗凝,但可能改變血漿pH值或干擾某些代謝物測定,因此應用范圍較窄。
選擇抗凝劑時,需結合實驗目的和檢測指標,避免因抗凝劑干擾導致假陽性或假陰性結果。例如,ELISA檢測細胞因子時,肝素或檸檬酸鈉抗凝血漿更為合適,而EDTA可能影響某些抗原-抗體結合。此外,抗凝劑與血液的比例也需嚴格把控,以確保樣本質量。
總之,合適的抗凝劑不僅能保證血漿樣本的穩定性,還能提高實驗數據的可靠性,是實驗成功的關鍵因素之一。
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?常見的血漿抗凝劑主要包括肝素、EDTA、檸檬酸鈉和草酸鹽等,它們各有特點,適用于不同的實驗需求。
?肝素是最常用的抗凝劑之一,通過與抗凝血酶Ⅲ結合,抑制凝血酶的活性,從而阻止纖維蛋白原轉化為纖維蛋白。肝素抗凝的血漿適用于大多數生化檢測和部分免疫學實驗,但高濃度的肝素可能干擾PCR和某些ELISA實驗,需謹慎使用。
EDTA(乙二胺四乙酸)通過螯合鈣離子阻斷凝血級聯反應,能有效防止血液凝固。EDTA抗凝的血漿適用于血液學檢測,如血細胞計數,但由于其可能影響某些金屬離子依賴性酶活性,一般不推薦用于鈣、鎂等離子的測定。
檸檬酸鈉通過與鈣離子結合發揮抗凝作用,常用于凝血功能檢測(如PT、APTT)。其抗凝效果穩定,且對ELISA實驗干擾較小,因此是許多免疫學研究的首選抗凝劑。
草酸鹽(如草酸鉀、草酸鈉)也能通過結合鈣離子抗凝,但可能改變血漿pH值或干擾某些代謝物測定,因此應用范圍較窄。
選擇抗凝劑時,需結合實驗目的和檢測指標,避免因抗凝劑干擾導致假陽性或假陰性結果。例如,ELISA檢測細胞因子時,肝素或檸檬酸鈉抗凝血漿更為合適,而EDTA可能影響某些抗原-抗體結合。此外,抗凝劑與血液的比例也需嚴格把控,以確保樣本質量。
總之,合適的抗凝劑不僅能保證血漿樣本的穩定性,還能提高實驗數據的可靠性,是實驗成功的關鍵因素之一。
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