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技術(shù)文獻

豬早老素2酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟

文字:[大][中][小] 2022-2-10    瀏覽次數(shù):388    
豬早老素2酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:
1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50%l。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40%l,然后再加待測樣品10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,再加入顯色劑 B50%l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50%l,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行。

NRK-52E,大鼠腎細胞
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C2C12, 小鼠肌原細胞
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CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系
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293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系
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HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞
HUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞系
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞
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3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞


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