技術文獻
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細胞全能性原理:植物細胞具有發育成完整個體的潛能,這是技術實施的理論核心。離體后的細胞在特定條件下可脫分化為愈傷組織,進而再分化形成完整植株植物細胞組織培養的關鍵技術原理。
植物細胞組織培養的關鍵技術原理
一、理論基礎
?細胞全能性?
植物細胞含有全套遺傳信息,在離體條件下通過脫分化形成愈傷組織,再經再分化形成完整植株?。這一特性是組織培養的理論基礎,其表達難易程度為:受精卵>生殖細胞>干細胞>體細胞?。
?代謝調控機制?
通過激素(如生長素和細胞分裂素)調控細胞分裂與分化,例如生長素/細胞分裂素比例決定愈傷組織形成或器官發生?。
二、關鍵技術流程
?外植體選擇與消毒?
選取健康組織(如莖尖、葉片)作為外植體,經酒精、次氯酸鈉等消毒處理以去除微生物污染?。
?培養基配制?
需包含無機鹽、碳源、維生素及植物激素,pH值通常調節至5.6-5.8?。MS培養基是常用基礎配方?。
?培養條件控制?
?溫度?:多數植物適宜25±2℃?。
?光照?:再分化階段需光照(12-16小時/天),脫分化階段可暗培養?。
?濕度?:維持90%以上相對濕度?。
?脫分化與再分化?
?脫分化?:外植體在激素誘導下形成無定形愈傷組織?。
?再分化?:調整激素比例誘導愈傷組織形成胚狀體或器官原基?。
