布魯氏菌?。╞rucellosis）又稱地中海弛張熱，馬耳他熱，波浪熱或波
狀熱，是由布魯氏菌(Brucellae)引起的人畜共患性全身傳染病。布魯氏菌為革
蘭氏陰性短小桿菌，初次分離時(shí)多呈球狀，球桿狀和卵圓形，故名。根據(jù)宿主
的不同，布魯氏菌分為 10 個(gè)種。目前已知有 60 多種家畜、家禽，野生動(dòng)物
是布魯氏菌的宿主。與人類有關(guān)的傳染源主要是牛布魯氏菌（Brucella
abortus）、羊布魯氏菌（Brucella melitensis）及豬布魯氏菌（Brucella
suis）。臨床上以羊、牛、豬三種意義最大，羊種致病力最強(qiáng)。因此基于 PCR
的快速檢測羊、牛、豬種布魯氏菌病具有重要的應(yīng)用價(jià)值。本產(chǎn)品就是專門用
于檢測羊、牛、豬種布魯氏菌病的 PCR 試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. BA、BM 和 BS 分別用于定性檢測牛、羊、豬布魯氏菌病，靈敏度遠(yuǎn)高于
ELISA 檢測法。
2. 專一性強(qiáng)，能分別檢測到各菌的幾乎所有亞型。
3. 引物根據(jù)全基因序列設(shè)計(jì)，特異性高。
4. 使用即用型 PCR 試劑盒，減少了操作步驟，降低了操作誤差。

運(yùn)輸及保存:

使用方法:

一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測樣品的 DNA，也可以另購本公司的細(xì)菌 DNAout 或
柱式細(xì)菌 DNAout，上述兩款產(chǎn)品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體細(xì)菌做陽性
對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成
分。最好在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)（60 uL 體系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
牛、羊、豬布魯氏菌專一性引物對
（三種之一） 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 DNA 1-5 uL 無 無
牛、羊、豬布魯氏菌陽性對照
（三種之一） 無 2 uL 無
補(bǔ)超純水到 30 uL 30 uL 30uL
即用型 PCR Mix 3.0 30 uL 30 uL 30 uL
4. 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR。
過程 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 95℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
（40 個(gè)循環(huán)）
95℃ 1 min
55℃ 1 min
72℃ 3 min
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。BA 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 783 bp；BM 預(yù)期的
PCR 產(chǎn)物長度為 162 bp；BS 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 393 bp。